چکیده ……………………………………………………………………………….1…..
فصل اول: مقدمه وکلیات
1- مقدمه وکلیات…………………………………………………………….3…..
1-1- اهمیت گیاهان دارویی………………………………………………. 3…..
1-2- گیاه شناسی زولنگ…………………………………………………………… 5…..
1-3- کاربرد گونه های مختلف ارنجیوم…………………………………… 8…..
1-4- آنتیاکسیدانها……………………………………………………………………… 10…..
1-5- تقسیم بندی کلی آنتیاکسیدانها………………………………………………… 13…..
1-6- آنتیاکسیدانهای مورد استفاده در مواد غذایی……………………. 13…..
1-6-1- آنتیاکسیدانهای سنتزی………………………………………………… 13…..
1-6-2- آنتی اکسیدان های طبیعی…………………………………… 15…..
1-6-2-1- ترکیبات فنولی ……………………………………………………………. 16…..
1-6-2-2- کاروتنوئیدها………………………………………………………………………. 20…..
1-6-2-3- اسید آسکوربیک (ویتامین C)………………………………………….. 21…..
1-6-2-4- توکوفرولها و توکوتریانولها……………………………………… 22…..
1-6-2-5- تاننها………………………………………………………………….. 22…..
1-6-2-6- آنزیم های آنتیاکسیدانی…………………………………………. 23…..
1-6-2-7- اسید لیپوئیک و گلوتاتیونها……………………………………………… 23…..
1-7- فرضیه ها…………………………………………………………………………… 24…..
1-8- اهداف………………………………………………………………………… 24…..
فصل دوم: منابع
2- ی بر تحقیقات انجام شده………………………………………………… 26…..
2-1- استخراج ترکیبات فنولی از منابع گیاهی………………………… 26….. 2-2-ارزیابی فعالیت آنتیاکسیدانی ترکیبات فنولی……………………………….. 30…..
فهرست
عنوان صفحه
فصل سوم: مواد و روشها
3- مواد و روشها……………………………………………………………….. 36…..
3-1- مواد و دستگاهها………………………………………………………………. 36…..
3-1-1- مواد اولیه………………………………………………………….. 36…..
3-1-2- مواد شیمیایی…………………………………. 36…..
3-1-3-دستگاهها و لوازم مصرفی ………………………………………… 37…..
3-2- آزمونهای شیمیایی…………………………………………………………….. 38
3-2-1- اندازه گیری رطوبت…………………………………………………….. 38
3-2-2- اندازه گیری خاکستر…………………………………………………. 39…..
3-2-3- اندازه گیری فیبرخام…………………………………………. 39
3-2-4- اندازه گیری پروتئین………………………………………………….. 40
3-2-5-اندازه گیری چربی………………………………………………………… 41
3-3- استخراج عصاره گیاه به روش سنتی (غرقابی)…………………………………………. 41
3-4- اندازه گیری ترکیبات فیتوشیمیایی…………………………………………….. 42
3-4-1- اندازه گیری محتوای کلروفیل و کاروتنوئید کل………………………………… 42
3-4-2- اندازه گیری ترکیبات فنولی کل……………………………………………………… 43
3-4-3- اندازهگیری ترکیبات فلاونوئیدی کل………………………………….. 44
3-4-4- محاسبه بازده استخراج……………………………………………………… 44
3-5- ارزیابی فعالیت آنتیاکسیدانی……………………………………………….. 44
3-5-1- ارزیابی فعالیت مهار رادیکال آزاد DPPH………………………………………. 44
3-5-2- ارزیابی فعالیت آنتیاکسیدانی عصارهها به روش ظرفیت آنتیاکسیدانی کل………………….. 45
3-5-3- ارزیابی فعالیت آنتیاکسیدانی عصارهها به روش قدرت احیاءکنندگی………………………….. 46
3-6- تجزیه و تحلیل آماری…………………………………………………………………. 47
فصل چهارم: نتایج و بحث
4- نتایج و بحث…………………………………………………………………………. 49
4-1- ترکیبات شیمیایی……………………………………………………………. 49
فهرست
عنوان صفحه
4-2- مقدار کل ترکیبات کلروفیل، کاروتنوئید ………………………………………………. 49
4-3- مقدار کل ترکیبات فنولی……………………………………………………. 50
4-4- مقدار کل ترکیبات فلاونوئیدی…………………………………… 57
4-5- ارزیابی فعالیت ضدرادیکالی، آنتیاکسیدانی و قدرت احیاءکنندگی عصارههای زولنگ……… 59
4-5-1- توانائی مهار رادیکالهای DPPH………………………………………………. 59
4-5-2- ظرفیت آنتی اکسیدانی کل …………………………………………………….. 66
4-5-3- قدرت احیاءکنندگی…………………………………………………………… 71
فصل پنجم: نتیجه گیری کلی و پیشنهادات
5- نتیجه گیری کلی و پیشنهادات …………………………………………………….. 78
5-1- نتیجه گیری کلی………………………………………………………….. 78
5-2- پیشنهادات ………………………………………………………… 79
5-2-1- پیشنهادات پژوهشی و اجرایی……………………………………………….. 79
فهرست منابع……………………………………………………………………………… 81
چکیده انگلیسی………………………………………………………………………. 91
چکیده
زولنگ سبزی خوراکی از خانواده آپیاسه و جنس ارنجیوم است که در نواحی جنگلی شمال کشور به وفور یافت می شود. هدف از این پژوهش، بهینهسازی استخراج ترکیبات فنولی کل از سبزی محلی زولنگ به روش استخراج غرقابی با سه حلال مختلف (استون، متانول و اتانول)، در دو غلظت متفاوت (50 درصد و 80 درصد)، در دو سطح دمایی (25 و 50 درجه سانتیگراد) و در طی زمان 24 ساعت بود. مقدار فنول کل عصارهها توسط روش فولین سیوکالتو سنجش و بر اساس میلیگرم گالیک اسید بر گرم عصاره بیان گردید. بیشترین میزان فنول کل در کلیه عصارهها، در غلظت 80 درصد و دمای 25 درجه سانتیگراد استخراج گردید که میزان فنول کل عصارههای استونی، اتانولی و متانولی به ترتیب 80/23، 85/25و36/26 میلیگرم گالیک اسید بر گرم عصاره بود(05/0 > P). در شرایط بهینه استخراج، میزان فلاونوئید کل عصارهها نیز به ترتیب 77/12، 17/13 و 73/17 میلیگرم کوئرستین بر گرم عصاره اندازه گیری شد. سپس فعالیت آنتیاکسیدانی عصارههای فنولی مختلف و نیز آنتیاکسیدان سنتزی BHT با آزمون های مهار رادیکالهای آزاد DPPH، ظرفیت آنتیاکسیدانی کل و قدرت احیاءکنندگی مورد بررسی قرار گرفت. تمامی عصارهها فعالیت آنتیاکسیدانی وابسته به غلظت را نشان دادند. در بین عصارههای فنولی زولنگ در هر سه آزمون ارزیابی ظرفیت آنتیاکسیدانی، عصارهی متانولی بالاترین فعالیت ضدرادیکالی و آنتیاکسیدانی را به خود اختصاص داد. این عصاره تنها در آزمون ظرفیت آنتیاکسیدانی کل کمترین میزان 50EC (96 میکروگرم در میلیلیتر) را نسبت به آنتیاکسیدان سنتزی BHT (22/140 میکروگرم در میلیلیتر) دارا بود و از این نظر قابل رقابت با آنتیاکسیدان سنتزی BHT بود (05/0 > P). در این آزمون در غلظتهای 50 و 100 میکروگرم در میلیلیتر عصارههای زولنگ بیشترین فعالیت آنتیاکسیدانی را داشتند. با توجه به مطالب بیان شده، میتوان گیاه محلی زولنگ را به عنوان منبع جدید و بالقوهای از ترکیبات فنولی و آنتیاکسیدانهای طبیعی معرفی و در فرمولاسیون مواد غذایی استفاده نمود.
واژه های کلیدی: ترکیبات فنولی، سبزی زولنگ، فعالیت آنتیاکسیدانی، قدرت احیاءکنندگی، DPPH.
مقدمه
1-1- اهمیت گیاهان دارویی
مواد موثره ترکیباتی هستند که در برخی گیاهان ساخته می شوند و تاثیر فیزیولوژیکی بر پیکر موجودات زنده بر جا میگذارند. این گیاهان برای مداوای برخی از بیماریها مورد استفاده قرار میگیرند. مواد فعال مذکور در طی یک سلسله فرایندهای ویژه و پیچیده بیوشیمیایی، به مقدار بسیار کم- معمولاً کمتر از وزن خشک گیاه ساخته میشوند و به متابولیتهای ثانوی نیز معروفند. کاشت، داشت و برداشت گیاهان دارویی، صرفاً به خاطر استفاده از مواد موثره آنها صورت میگیرد. اساسا از گیاهان حاوی مواد موثره استفادههای مختلفی به عمل می آید و این گیاهان به سه گروه اصلی شامل: گیاهان دارویی، گیاهان ادویهای و گیاهان عطری طبقه بندی میشوند. گاهی اوقات از یک گیاه به تنهایی میتوان هر سه استفاده را نمود (امید بیگی، 1384).
بعد از جمع آوری گیاهان دارویی، اندامهای جمعآوری شده را باید تحت تاثیر عملیات مناسبی قرار داد تا به صورت قابل استفاده درآید(خشک کردن، استخراج ماده موثره، بسته بندی و …). در حال حاضر استفاده از مواد موثره گیاهان دارویی در صنایع غذایی، رشد روز افزونی پیدا نموده است. اگرچه استفاده از مواد مذکور در صنایع غذایی از گذشته معمول بوده، ولی اکنون در صنایع نوپای نوشابه سازی، کنسروسازی، شیرینی سازی و … از مواد موثره گیاهان دارویی برای بهتر شدن طعم و بو و رنگ محصولات در سطح دقیقتر و حساب شدهتری استفاده می شود. تقسیم بندی مواد موثره ( دارویی) گیاهان که امروزه نیز مورد تایید میباشد، شامل چهار گروه اصلی آلکالوئیدها، گلیکوزیدها، روغنهای فرار و سایر مواد موثره است. منظور از سایر مواد موثره، ترکیباتی چون مواد تلخ، فلاونها، فلاونوئیدها ، موسیلاژها (و کربوهیدراتهای خاص مشابه آنها)، ویتامینها، تاننها، اسید سالیسیلیک (و اسید های خاص مشابه آن) و بالاخره ترکیبات دیگر امثال آن است که به دلیل نا همگونی و گستردگی ساختمانهای شیمیایی، در سه گروه قبلی جای نمیگیرند (امید بیگی، 1384).
امروزه با پیشرفتهای حاصل در شیمی آلی و تحولات چشمگیر در روشهای استخراج، تخلیص و تعیین ساختمان تركیبات طبیعی گیاهان، ارزشداروهای حاصل از منابع گیاهی روز به روز آشكارتر شده است (والن، 2002). به طوری كه در حال حاضر حدود یک سوم تا نیمی از فرآورده های دارویی موجود در آمریكا دارای منشاء گیاهی هستند (کلارک، 1996). همچنین در انگلستان تولیدات گیاهی و مكملهای فراوانی به شكل سالم و بیخطر تولید شده است (کورنز، 2004). مطالعات نشان میدهد كه تمایل زیاد، به استفاده از این داروها جهت درمان بیماریها، به علت عوارض پایینتر این داروها نسبت به داروهای شیمیایی است (کوان، 1999).
در كشور ایران نیز، بعلت تنوع آب و هوایی و داشتن شرایط اكولوژی منحصر به فرد زمینه رشد و نمو گیاهان حاوی مواد مؤثره و داروئی فراهم است. یکی از این گیاهان Eryngium Caucasicum است که نام محلی آن در استان گلستان زوله یا زولنگ میباشد این گیاه از دیر باز مورد توجه بومیان این منطقه قرار گرفته است.
1-2-گیاه شناسی زولنگ
گیاه زولنگ با نام علمی Eryngium caucasicum ، از راسته آرالیالها [1]( امید بیگی، 1384) و تیره جعفری[2] یا چتریان[3] می باشد ( مظفریان، 1382؛ قهرمان، 1372). سرزمین ایران از مراکز اصلی تجمع و پراکنش انواع بیشماری از گیاهان تیره اومبلیفر (جعفری) است که تقریبا بیش از 100 جنس با گونه های بسیار در آن انتشار دارند ( قهرمان، 1372).